★★ノーザン・ウェスタン総合統括スレッド1★★

語るぜ！！！！！！！

断る。

サザンはスレ違いなのか

語ろう、と呼びかけておいて自分は何も語らない奴は何人もみてきたが、
語るぜ！！！！！！！　と叫んでおいて語らない奴は初めて見たよ。

核酸が拡散した。

RNAとタンパクを統括するのは難しくないか。

age

サウスイースタンとか

age

>>5
核の拡散よりマシ

マウスの心筋タンパクをαーtubで反応させるとbandが2本出るんだけど、
これって何故？

ae

>>11
良いネタもらっちゃったよ。サンキュー！

>>13
正直教えて頂きたいのだが

みなさん、何穴まで使ってウェスタンしてます？
20アナだとかなり汚く出てしまうのだが。

スレ違いのレスが来そうな悪寒。

俺もたくさんあったほうがいいと思ってたけど
案外うまくいかないんだよね。
12穴だと結構綺麗にいくんだけど。
うまいテクとかある？

15までは実用範囲内かな。
それ以上だと、いつもきれいに出るとはいい難い。あくまで印象だが。

あと、PVDF膜のブロッキングはスキムミルクを使ってるんだけど、何分くらいブロックしてますか？
30分でも長いのかな。

メンブランにタンパク貼り付けて、それに核酸がくっつくかどうかって出来る？
いくら調べてもタンパクDNAの結合能アッセイはEMSAかChIPしか探せないんですが
もし何か知ってる人がいたらレスきぼん。

Southwesternでググれ

>>19
即レスサンクス。色々あるんだな。パンピーですまん。

Southwesternだけだと関係ないのが死ぬほど出るので、"Southwestern blotting"が吉

さげ

>>22
あげ

何ウェルとか言えばいいではないか。

ウェスたんにハアハアするスレ、終わったんだ…ちょっと残念。

native PAGEのプロトコールをネットで探しているのですがみつかりません。
どなたかご存知なら教えていただけないでしょうか。

SDSを抜けばＯＫ

26です。βメルカプトエタノールなどの還元剤を抜くことも考えていますが、そのあたりはいかがでしょうか。

タンパクをやる限り、SDSやメルカプトエタノールは抜けないのでは？？
DNAのnative PAGEなら不要かもしれないけど

ttp://ja.wikipedia.org/wiki/%E3%83%9D%E3%83%AA%E3%82%A2%E3%82%AF%E3%83%AA%E3%83%AB%E3%82%A2%E3%83%9F%E3%83%89%E3%82%B2%E3%83%AB%E9%9B%BB%E6%B0%97%E6%B3%B3%E5%8B%95
タンパクでもやるそうですが、いかがでしょうか。

>28
少なくとも細胞質内は還元的環境だから、
ﾒﾙｶﾌﾟﾄｴﾀﾉｰﾙとかDTTを抜いたらどこがﾈｲﾃｨﾌﾞなんだろう。

毛玉　毛玉　やっぱり　毛玉
毛玉　毛玉ハゲハゲ
毛玉がハゲてくる

玉毛玉毛玉毛玉
毛玉毛玉毛玉毛
玉毛玉毛玉毛玉
毛玉毛年毛玉毛
玉毛玉毛玉毛玉
毛玉毛玉毛玉毛

なぜウェスタンなのか！？
ttp://www.gelifesciences.co.jp/newsletter/biodirect_mail/chem_story/83.asp

富山県から記念真紀子

生暖かく見物

ウエスタンの泳動Bufferって流しても平気ですか？廃液ですか？
今更な質問ですみません。

グリシンとTrisとSDSだから、実験廃液用の流しなら良いんジャマイカ？

northwesternでぐぐれ

TNTTからきますた

左京から眺める梟系の人

293T細胞のβactinをウエスタンで見たんですが、BSAで抗体を希釈したら
6~70kDaにバンドが出ました。スキムミルクで希釈するとちゃんと40kDa付近に出ます。
どうしてですか？抗体はSIMAのマウスモノクロです。別の研究室でやってた頃は
そんなことなかったんですが。

なぜ毛玉なのか

毛玉ケダマンケダモノ説

>>07
＞ウェスたんにハアハアするスレ、終わったんだ…ちょっと残念。