935 :
名無しゲノムのクローンさん :03/07/26 19:34
あげ
>926 ペプチドグリカンの構成成分であるMDPがNODを介してRip2-NFkBを活性化する。プラスミドにペプチドグリカンはどのぐらいコンタミしているのだろうか? >932 大腸菌から精製したプラスミドはTLR9のagonisitとして作用するから、931の言うようにtransientでベクター型は使用しない方が無難と思う。
みんなsiRNAに標識してる(FITCとか)?
938 :
名無しゲノムのクローンさん :03/07/29 00:38
∧_∧ ∧_∧ ピュ.ー ( ・3・) ( ^^ ) <これからも僕たちを応援して下さいね(^^)。 =〔~∪ ̄ ̄ ̄∪ ̄ ̄〕 = ◎――――――◎ 山崎渉&ぼるじょあ
940 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/02 13:36
てゆーか
941 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/02 22:01
で、結局の所はRNAiって何なのよ?
Hes1 is a target of microRNA-23 during retinoic-acid-induced neuronal differentiation of NT2 cells.
944 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/03 12:26
致死遺伝子でなければKOした方が早いかもね。
KO1年かかるよ
946 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/03 21:46
最低で一年って感じ? でも、RNAiってサイドエフェクトあるでしょ? 完全に特異的に抑える事は難しいし。 信頼性のあるデータ出すなら結局KOがいいかと。
947 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/04 18:36
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949 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/09 08:08
>948 うちはあたりましたがなにか?
951 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/10 02:33
KOならサイドイフェクトがないとでもいいたげな。
一番の問題はな、KOは細胞(in vitro)で実験できんことだ。 細胞でも簡単にKOホモできるのならRNAiなんて殆どメリットないのだが。
>952 MEFとれ
>953 そう言う香具師もいると思ったが(藁 1)時間がかかる(細胞なら数日) 2)細胞タイプが限定 3)lethalityの問題(発生段階かなり初期での) 4)特殊な設備・技術が必要 などで将来的には細胞(in vitro)はRNAiに期待。
や、「細胞で実験できん」とあったので。(w 致死遺伝子の場合は確かに普通の手ではどうしようもないが、 それもCre-lox系を使うなりTet-On/Off系を使うなり、 工夫次第で解決できると思われるよ。 金と手間と技術が必要で外れたらダメージデカいのが KOの最大のデメリットだが、当たれば他で手に入らない材料が 得られる分、旨味もデカい。 うまく用途で使い分けたいものだ。
956 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/11 19:49
>KOならサイドイフェクトがないとでもいいたげな 実験上のサイドエフェトの話ね。 ノックアウト作った事ないから確信はないけど、 一応単一遺伝子を潰していて、 それ以外のゲノムには傷が入ってないんだよね? RNAiの場合は、おそらく他の遺伝子も抑制しているように思うのだが。 トランスフェクションによる効果も無視できないだろうし。 特異性高いって言っても、完全に特異的にするのは無理じゃないか?
957 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/12 00:09
Cre-lox、Tet-On/Off系って 最初期待されたほど汎用性あるんかいな? 実際、使ってる香具師なんて極一部。 むしろTet-On/OffとRNAiの組み合わせに期待してるのだが。
958 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/12 10:26
>957 どう組み合わせる? もし差し支えなければ聞かせてくれ。
960 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/13 20:59
>956 確かに、KOは単一遺伝子のみを破壊してるから(ほんと?)、 RNAiのように非特異的な阻害を心配する必要はない罠
961 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/13 21:11
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962 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/13 21:33
>958 どう組み合わせる? いやいや、具体的じゃなくて単なる期待。 でも実際にやってるのは間違いないらしいよ。 オレも強調して質問したのだがpol IIIプロモーターにもtet使えるって。 あと上にもあったと思うが、理研のDECAPってベクター知ってる。 pol IIIで無くてもいいらしいから、できるのかも? って程度の内容だけど、まず1年以内に論文でるんじゃない、 誰でも考えることだから。
>963 要はTetONでRNAiのStable取ってinducibleな系作るってことで? それならいけるかな。 うちでも似たようなの作ってるし。 #まだpaperになってないので書けない。すまん。
(⌒V⌒) │ ^ ^ │<これからも僕を応援して下さいね(^^)。 ⊂| |つ (_)(_) 山崎パン
966 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/16 13:44
tetシステムって使えるの? IPTGよりも?
967 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/19 03:16
IPTGなつかすい
やっぱり、みんなオンオフのシステム欲しい?
969 :
無料動画直リン :03/08/20 00:09
970 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/20 00:30
972 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/21 20:28
ちょっこっとRNAiについて雑誌で読みました World food & bio News , may 2003 ハエではdsRNAを発現させた大腸菌付エサを食べさせるとのことですが 当方植物系なのでよくわかりません。 ハエのどのような部分で発現するんでしょうか? 菌が細胞に取り込まれる?わけないですよね?
973 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/21 21:22
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975 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/24 23:44
>972 feeding method C.elegans
976 :
名無しゲノムのクローンさん :03/08/25 10:27
laevisで誰か導入した人いないの? 発生系で試したいんだけど。 教えて下さい。
977 :
名無しゲノムのクローンさん :03/09/09 00:32
最近カキコ少ないね。 ところで、このところ、IFNレス関係の報告多くない? 一時期このスレでも話題になったけど。 どーなんだろ。
978 :
名無しゲノムのクローンさん :03/09/09 03:30
例えばどんなの?
979 :
名無しゲノムのクローンさん :03/09/09 11:36
age
981 :
名無しゲノムのクローンさん :03/09/11 00:01
>978 Nat Cell Biol.2003/Vol 5/Number 9/pp 834 とか。
982 :
名無しゲノムのクローンさん :03/09/11 03:25
このスレのどこかで誰かが警告してた事が いよいよ真実味を帯びてきたわけね。
983 :
名無しゲノムのクローンさん :
03/09/11 11:42 >>981 あの論文は今まで言われていたことを一気にまとめたという感じだね。
これでIFNがからんだRNAi論文はクズ同然だろうし、他の論文もRNAiだけの
事象じゃ相手にされなくなるかも。